Rôle fonctionnel des cellules MAIT dans le carcinome hépatocellulaire (CHC)

Responsable de l’encadrement : Pr. Jean-Pierre COUTY

Tél : …0620658168  Fax : ……………………… E-mail:  …jean-pierre.couty@inserm.fr…

Centre de Recherche des Cordeliers

Résumé du Projet de Stage

Contexte : Depuis quelques années, l’immunothérapie est au centre de la prise en charge du cancer primitif du foie ou carcinome hépatocellulaire (CHC) à un stade avancé. Seulement 1/3 des patients présentent une stabilisation de la progression de leur maladie. La prise en compte du microenvironnement immunitaire des tumeurs du foie (cellules immunitaires autour et/ou contact des cellules tumorales), notamment la compréhension des mécanismes permettant la surveillance des tumeurs par le système immunitaire, demeure fondamentale dans le développement de nouveaux traitements. Les cellules MAIT (Mucosal-Associated Invariant T cells) sont des lymphocytes présents en grande quantité dans le foie et jouent un rôle dans la surveillance immunitaire. Cependant, leur rôle dans le CHC reste peu étudié. Les MAIT ont été associées à un mauvais pronostic dans les maladies fibrosantes du foie. Leur rôle dans la tumorigenèse du foie est peu connu.

Notre équipe a montré que l’activation oncogénique de la béta-caténine (mutation CTNNB1 dans plus 1/3 des CHC humains) mettait en place des mécanismes d’échappement à l’immunosurveillance en compromettant la fonctionnalité des invariants NKT à forte activité anti-tumorale (Anson M et al., JCI 2012, Cadoux M et al., J Hepatol 2021, Araujo J et al., en préparation). Compte tenu de la parenté fonctionnelle étroite avec les invariants NKT et de leur accumulation dans le foie chez l’homme, nous émettons l’hypothèse que les MAIT seraient des acteurs importants du microenvironnement immunitaire hépatique impliqués dans la cancérogenèse du foie.

Données préliminaires : Nos travaux récents suggèrent que les MAIT sont accumulées dans les foies tumoraux avec augmentation conjointe de l’expression des chimiokines de recrutement CCL20, CXCL16 par le microenvironnement tumoral. Par ailleurs, nous montrons une modification de la distribution MAIT 1/MAIT 17 dans les tumeurs hépatiques avec un potentiel cytotoxique diminué par rapport aux conditions non tumorales. De façon intéressante, le blocage de MR1 à un stade initial de la tumorigenèse provoque une augmentation importante de la prolifération des hépatocytes tumoraux. Ensemble ces résultats suggèrent que les cellules sont modifiées aux différentes étapes de la tumorigenèse hépatique.

Objectifs de l’étude : Les objectifs du master 2 seront de définir le rôle des MAIT dans les CHC mutés CTNNB1 et d’appréhender leur plasticité face aux signaux du microenvironnement tumoral auxquels elles sont exposées.

Méthodes : Ce travail sera réalisé à partir de modèles murin (enrichis B6 CAST/CAST ou déficients B6 CAST/CAST MR1-/- en MAIT) récapitulant la tumorigenèse dépendante de l’activation oncogénique de la béta-caténine (approche Genome-Editing CRIPR-Cas9 et injection hydrodynamique de constructions oncogéniques).

Axe 1 : Dans un premier temps, une caractérisation phénotypique et fonctionnelle par cytométrie en flux sera réalisée. Ces expériences seront suivies d’un tri cellulaire des cellules MAIT en ségrégant MAIT1 et MAIT17 pour analyser au niveau moléculaire leur programme transcriptionnel par RNA-Seq.

Axe 2 : Dans un second temps, nous aurons recours à des expériences permettant de bloquer le TCR des cellules MAIT et analyserons les conséquences sur le remodelage du microenvironnement immunitaire et sur l’hépatocyte transformé.

 Dernières Publications en lien avec le projet :

  1. Donne R, Saroul-Ainama M, Cordier P, Hammoutene A, Kabore C, Stadler M, Nemazanyy I, Galy-Fauroux I, Herrag M, Riedl T, Chansel-Da Cruz M, Caruso S, Bonnafous S, Öllinger R, Rad R, Unger K, Tran A, Couty JP, Gual P, Paradis V, Desdouets C. Replication stress triggered by nucleotide pool imbalance drives DNA damage and cGAS-STING pathway activation in NAFLD. Developmental Cell 2022, 57, 2022, 1728-1741. PMID: 35768000. IF 13,47
  2. Cadoux M, Caruso S, Pham S, Gougelet A, Pophillat C, Riou R, Loesch R, Colnot S, Nguyen CT, Calderaro J, Celton-Morizur S, Guerra N, Zucman-Rossi J, Desdouets C, COUTY JP. Expression of NKG2D ligands is downregulated by beta-catenin signaling and associates with HCC aggressiveness. Journal of Hepatology 2021, Jun;74(6):1386-1397. PMID: 33484773. IF 30,08
  3. Bou-Nader M, Caruso S, Donne R, Celton-Morizur S, Calderaro J, Gentric G, Cadoux M, L’Hermitte A, Klein C, Guilbert T, Albuquerque M, Couchy G, Paradis V, COUTY JP, Zucman-Rossi J, Desdouets C. Polyploidy spectrum: a new marker in HCC classification. Gut. 2020 Feb;69(2):355-364. PMID: 30979717. IF 19,8.
  4. Fortier M, Cadoux M, Boussetta N, Pham S, Donné R, COUTY JP, Desdouets C, Celton-Morizur S. Hepatospecific ablation of p38α MAPK governs liver regeneration through modulation of inflammatory response to CCl4-induced acute injury. Sci Rep. 2019 Oct 10;9(1):14614. PMID: 31601995. IF 4,5.

  5. L’Hermitte A, Pham S, Cadoux M, Couchy G, Caruso S, Anson M, Crain-Denoyelle AM, Celton-Morizur S, Yamagoe S, Zucman-Rossi J, Desdouets C, COUTY JP. Lect2 controls inflammatory monocytes to constrain the growth and progression of hepatocellular carcinoma. Hepatology 2019 Jan;69(1):160-178. PMID: 30070727. IF 14,7.

Ce projet s’inscrit dans la perspective d’une thèse

 Ecole Doctorale de rattachement : ED BioSPC

                                       

Equipe d’Accueil : « Altérations du Génome, Immunité et Cancer du Foie : Mécanismes Moléculaires et Applications Thérapeutiques »

Intitulé de l’Unité : Centre de Recherche des Cordeliers CRC INSERM U1138

Nom du Responsable de l’Unité : Pr. Jessica ZUCMAN-ROSSI

Nom du Responsable de l’Équipe : Directrice : Dr. Chantal DESDOUETS, Directeur adjoint : Pr. Jean-Pierre COUTY

Adresse :  15, Rue de l’Ecole de médecine, 75006 PARIS