Protéines de fusions et anticorps bifonctionnels comme biothérapie dans les maladies auto-immunes à IgG.
Responsable de l’encadrement : Claire Deligne
Tél : 06199196165…… Fax : ……………………… E-mail: claire.deligne@sorbonne-universite.fr
Résumé du projet (environ une demi-page)
Immunoglobulin G-degrading enzyme (IdeS) est une cystéine protéinase bactérienne. Cette enzyme de 35 kDa clive les IgG humaines solubles et les BCR au niveau de leur région charnière (Gly236), baissant fortement la demi-vie des IgG. Une IdeS recombinante (Imlifidase) est utilisée en clinique pour le traitement de patients en amont d’une transplantation rénale, et fait l’objet d’essais cliniques dans le traitement de différentes maladies auto-immunes à IgG. L’hémophilie A (HA) est une maladie génétique hémorragique résultant d’un déficit en facteur VIII (FVIII) de la coagulation. Le traitement des saignements repose sur l’injection de FVIII exogène. Cependant, 30% des patients atteints d’HA développent des IgG, dits allo-anticorps, qui neutralisent le FVIII administré. Notre équipe a récemment montré la capacité d’IdeS à cliver des IgG polyclonales anti-FVIII dans le plasma de patients et dans un modèle murin. IdeS est donc prometteuse dans le traitement de l’HA et, potentiellement, dans de nombreuses maladies impliquant les IgG. Cependant, IdeS clive l’ensemble des IgG circulantes, ce qui entraine une immunosuppression importante exposant les patients à un risque accru d’infections.
Afin de contourner ce problème, notre équipe a récemment cloné, produit et purifié deux constructions permettant de rendre l’action d’IdeS plus spécifique. Une première construction consiste à cliver les IgG circulantes ou le BCR membranaire spécifiques du FVIII en fusionnant IdeS à un domaine immunogène de cette protéine (IdeS-FVIII), et la seconde à restreindre l’activité d’IdeS au niveau des plaquettes, donc du site de saignement, en fusionnant IdeS à un anticorps spécifique des plaquettes, GPVI (IdeS-GPVI). Les objectifs de ce projet se concentrent sur la validation fonctionnelle de ces constructions :
1/ La capacité des constructions IdeS-FVIII à reconnaitre le FVIII se fera par ELISA (pour les anticorps anti-FVIII purifiés ou depuis le plasma de patients HA) ou par cytométrie en flux (pour les lymphocytes B dont le BCR-IgG est spécifique du FVIII).
2/ Pour les constructions IdeS-GPVI, des plaquettes humaines de donneurs sains seront purifiées et la fixation de la construction à la surface des plaquettes sera confirmée par cytométrie en flux.
3/ Les constructions seront testées in vitro sur la base de la capacité d’hydrolyse d’IdeS vis-à-vis d’IgG spécifiques ou non du FVIII ou du BCR de lymphocytes B (FRET, SDS-PAGE, Western blot, et cytométrie en flux).
Dernières Publications en lien avec le projet :
The IgG-degrading enzyme, Imlifidase, restores the therapeutic activity of FVIII in inhibitor-positive hemophilia A mice. Bou-Jaoudeh M, Delignat S, Daventure V, Astermark J, Lévesque H, Dimitrov JD, Deligne C, Proulle V, Lacroix-Desmazes S. Haematologica. 2023
Transplacental delivery of therapeutic proteins by engineered immunoglobulin G: a step toward perinatal replacement therapy. Mimoun A, Bou-Jaoudeh M, Delignat S, Daventure V, Reyes Ruiz A, Lecerf M,Azam A, Noe R, Peyron I, Christophe OD, Lenting PJ, Proulle V, McIntosh J, Nathwani AC, Dimitrov JD, Denis CV, Lacroix-Desmazes S. J Thromb Haemost. 2023
IgG-cleaving endopeptidase enables in vivo gene therapy in the presence of anti-AAV neutralizing antibodies. Leborgne C, Barbon E, Alexander JM, Hanby H, Delignat S, Cohen DM, Collaud F, Muraleetharan S, Lupo D, Silverberg J, Huang K, van Wittengerghe L, Marolleau B, Miranda A, Fabiano A, Daventure V, Beck H, Anguela XM, Ronzitti G, Armour SM, Lacroix-Desmazes S, Mingozzi F. Nat Med. 2020
A rationally-engineered IL-2 improves the antitumor effect of anti-CD20 therapy. Casadesús AV, Deligne C, Diallo BK, Sosa K, Josseaume N, Mesa C, León K, Hernández T, Teillaud JL. Oncoimmunology. 2020
Ce projet s’inscrit-il dans la perspective d’une thèse : non
Equipe d’Accueil : Equipe 16 Immunopathologies et immuno-interventions thérapeutiques
Intitulé de l’Unité : INSERM UMRS1138 Centre Recherche Cordeliers
Nom du Responsable de l’Unité : Jessica Zucman-Rossi
Nom du Responsable de l’Équipe : Sébastien Lacroix-Desmazes
Adresse : 15 rue de l’Ecole de Médecine 75006 Paris